基于Notch 1/NF-κB/STAT3通路探讨塞来昔布逆转NK/T细胞淋巴瘤细胞阿霉素耐药的作用机制

• 作者: 张鹏 潘战和 王小梅 王馨 纪浩南 苏安
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 塞来昔布 NK/T细胞淋巴瘤细胞 阿霉素耐药 Notch1/NF-κB/STAT3通路
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1330-1336
• 页数: 7页
• 分类号: R965.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.12092/j.issn.1009-2501.2020.12.002

摘要

目的:观察塞来昔布(celecoxib)对淋巴瘤细胞SNK6阿霉素(adriamycin)耐药性的逆转及作用机制.方法:不同浓度的塞来昔布(10、20、40、60、80、100μmol/L)作用于SNK6和SNK6/ADR细胞,噻唑蓝比色法(MTT)检测塞来昔布对SNK6及SNK6/ADR细胞的生长抑制率,筛选塞来昔布对SNK6/ADR的低毒浓度,计算半数抑制浓度(50％inhibitory concentration,IC50)值;采用低毒浓度塞来昔布联合不同浓度的阿霉素处理SNK6/ADR后,测得阿霉素联合塞来昔布后的IC50,并计算逆转倍数;选择低毒浓度塞来昔布联合阿霉素处理SNK6/ADR细胞后,应用流式细胞术测细胞凋亡情况;药物蓄积实验检测罗丹明123蓄积情况;用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcrip-tion-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Notch 1、核转录因子 κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、信号转导子和转录激活子(signal trans-ducer and activator of transcription 3,STAT3)mR-NA表达水平;用蛋白质印迹法(Western blot)检测Notch 1、NF-κB、STAT3、P-gp蛋白表达水平.结果:不同浓度塞来昔布可明显抑制SNK6、SNK6/ADR细胞的增殖,且其抑制作用随着塞来昔布浓度的增大而增加.塞来昔布对SNK6细胞的IC50为(57.54±6.89)μg/mL,对SNK6/ADR细胞的IC50为(43.39±4.38)μg/mL,阿霉素对SNK6/ADR细胞的IC50为(7.34±0.56)μg/mL,与10μmol/L塞来昔布联合作用后,阿霉素对SNK6/ADR细胞的IC50为(3.51±0.25)μg/mL(P<0.01),逆转倍数为2.09;阿霉素与10μmol/L塞来昔布联合作用后,与阿霉素组比较,SNK6/ADR细胞凋亡率显著增加(P<0.01);细胞内罗丹明123的蓄积量显著增加(P<0.01);SNK6/ADR细胞内P-gp蛋白表达显著降低(P<0.01);SNK6/ADR细胞内Notch 1、NF-κB、STAT3 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01).结论:塞来昔布可诱导NK/T细胞淋巴瘤细胞凋亡及逆转其阿霉素耐药,其可能是通过调节Notch 1/NF-κB/STAT3信号通路来实现的.