NONHSAT184603.1基因对解旋酶基因BLM表达的影响

• 作者: 吴小敏 吴巧群 崔小芝 杨丽红 罗斌杰 许厚强 谌颖莲
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 前列腺癌细胞 BLM解旋酶 Hippo信号通路 NONHSAT184603.1
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1642-1651
• 页数: 10页
• 分类号: S828|Q28
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.09.013

摘要

解旋酶BLM(bloom helicase)在细胞的增殖生长过程中有着重要的调控作用,YAP(yes associated protein)和TAZ(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)蛋白作为哺乳动物Hippo信号通路下游的转录共激活因子和关键成分,参与调控细胞的增殖、凋亡以及迁移等多种生理过程,而长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)在细胞的生长增殖过程中具有重要的调控作用.为探究LncRNA对BLM、YAP、TAZ表达的影响,本研究通过mirBase(http://www.mirbase.org/)、NONCODE(http://www.noncode.org/)及自主开发程序SWChen 2.3筛选与BLM解旋酶相关的LncRNAs,利用荧光定量PCR技术检测筛选的LncRNA在22RV-1、PC3、LNCap、WPMY-1四种细胞系中的表达情况,构建LncRNA超表达载体,检测转染后24及48 h LncRNA对BLM、YAP及TAZ的影响.本研究以筛选出的NONHSAT184603.1(缩写为N183)(GenBank No.m121218_085412_00126_c100)为候选基因,荧光定量PCR检测结果显示,N183在前列腺癌细胞系22RV-1和LNCap细胞中的表达极显著低于前列腺正常上皮细胞系WPMY-1(P<0.01),但在前列腺癌细胞系PC3中的表达极显著高于WPMY-1(P<0.01);WPMY-1细胞转染N183超表达载体24 h后与对照组比较,BLM表达极显著下调(P<0.01),且TAZ表达也是极显著下调(P<0.01),转染48 h后BLM和YAP表达均极显著上调(P<0.01);PC3细胞在转染48 h后,BLM表达量显著下调(P<0.05),但YAP和TAZ表达差异不显著(P>0.05);以上结果表明N183在前列腺癌细胞及正常细胞中能够抑制BLM基因的表达,但对增殖指标基因YAP和TAZ的影响具有差异,为今后以BLM解旋酶为抗癌靶标对抗癌症提供基础数据.