三疣梭子蟹JHEH基因的克隆及表达分析

• 作者: 郑亮 谢熙 郑宏坤 徐东杰 朱冬发
• 来源期刊: 华北农学报
• 关键词: 三疣梭子蟹 保幼激素环氧化水解酶(JHEH) 表达分析 蜕皮周期 卵巢发育
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·水产·兽医|Animal·Fisheries·Husbandry
• 页码范围: 225-234
• 页数: 10页
• 分类号: Q78|S968
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.20191281

摘要

为了探究JHEH在甲壳动物中的作用,利用RACE技术克隆获得了三疣梭子蟹JHEH(PtJHEH)基因的全长eDNA序列,运用生物信息学分析了JHEH的分子特征,并通过实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)方法检测了JHEH基因在三疣梭子蟹不同组织、蜕皮周期和卵巢发育时期中的表达水平变化.PtJHEH全长1 803 bp,包含1 374 bp的开放阅读框(ORF),编码467个氨基酸.推导的氨基酸序列具有跨膜结构域和信号肽,包含典型的环氧化酶催化结构域.qPCR结果显示,PtJHEH转录本在各个组织中均有表达,但在肝胰腺中表达量最高,显著高于其他组织(P＜0.05),这可能与肝胰腺是甲壳动物物质代谢的主要场所有关.在蜕皮周期中,肝胰腺PtJHEH在蜕皮前期D2期表达量最大,而Y器中PtJHEH则在蜕皮后期表达水平较高,随后显著下降.在卵巢发育过程中,肝胰腺和Y器PtJHEH的表达水平均在卵黄合成晚期(Ⅲ期)升至最高.PtJHEH在蜕皮周期和卵巢发育中的表达模式与课题组已报道的血淋巴MF水平存在一定相关性,推测其参与MF的降解代谢过程.