凤丹牡丹胚培养体系建立及初代畸形苗甲基化变异分析

• 作者: 侯小改 廉小芳 张婉青 张有福 李昱莹 郭丽丽
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 凤丹牡丹 成熟种胚 外源添加物 胚培养体系 胚培养畸形苗 甲基化
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 110-119
• 页数: 10页
• 分类号: S685.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.11.014

摘要

为提高凤丹牡丹组培技术在生产实践中的应用效率,以当年采收油用牡丹凤丹成熟种胚为外植体进行离体培养,设置不同光照及温度培养条件、不同大小成熟种胚、不同植物生长调节剂配比、不同质量浓度外源添加物等处理,完善凤丹牡丹胚培养体系;运用甲基化敏感多态性技术(MSAP)对培养过程中出现的畸形组培苗进行甲基化水平及模式变异的分析.结果表明,试验范围内最优培养条件为接种后进行7 d暗培养随即转入光照培养,适宜培养温度为(25±1)℃;适宜外植体为≥3 mm的成熟种胚;最优植物生长调节剂配比为0.8 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,其基础培养基为改良MS(Ca2+加倍)培养基;与不添加外源物质相比,凤丹牡丹胚乳的添加对成苗率具有极显著抑制作用,添加75 mL/L椰汁处理组培养效果较好,成苗率为85.66％,添加1.0 g/L活性炭处理组成苗率最高,为90.46％.相较于正常组培苗,畸形苗总扩增位点数增多21.20％,总甲基化位点数减少12.97％;正常组培苗总甲基化率为85.38％,畸形苗总甲基化率为74.30％;畸形苗甲基化多态型变异占主导(82.37％),其中去甲基化变异类型占比最多,为46.45％.综上,建立凤丹牡丹胚培养体系适宜培养方案如下:改良MS(Ca2+加倍)+0.8 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+1.0 g/L活性炭(或75 mL/L椰汁),培养条件为(25±1)℃ 下7 d暗培养后光照培养.相较于正常组培苗,凤丹牡丹胚培养畸形苗总甲基化率较低,以多态型去甲基化变异为主.