miR-490-5p靶向SP1抑制骨肉瘤的发生发展

• 作者: 余孟英 王金莲 蒲劲松 陈路
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-490-5p SP1 骨肉瘤细胞MG63
• 年，卷（期）: 2020,（14）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 1745-1750,1755
• 页数: 7页
• 分类号: R734.2
• 字数: 5170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.14.017

摘要

目的:研究miR-490-5p对骨肉瘤细胞生长和运动的作用.方法:体外实验设置control组、mimic-NC组、miR-490-5p mimic组、SP1组、mimic+SP1组,通过Lipofectamine 2000将质粒分别或联合转染进入各组骨肉瘤MG63细胞,运用基因预测软件预测靶基因,荧光素实验验证靶向关系,RT-qPCR检测miR-490-5p和SP1的表达,MTT法检测细胞增殖,Western blot检测Ki67、PCNA、Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9、E-cadherin和N-cadherin的表达,Transwell检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移;体内实验设置Control组和miR-490-5p mimic组,分别在裸鼠右后肢腹侧皮下注射0.2 ml骨肉瘤MG63细胞和转染miR-490-5p mimic的骨肉瘤MG63细胞悬液,第30天颈椎脱位法处死裸鼠,电子天平称肿瘤重量,Western blot检测Ki67、Bax、caspase-3、E-cadherin蛋白表达情况.结果:miR-490-5p在骨肉瘤细胞MG63中低表达,miR-490-5p与SP1在3'UTR区存在结合位点,miR-490-5p直接靶向作用于SP1,且miR-490-5p过表达抑制SP1表达;在体外,miR-490-5p过表达明显降低骨肉瘤MG63细胞生长速度,下调Ki67、PCNA和Bcl-2表达,上调Bax、caspase-3和caspase-9表达,减少侵袭细胞数目,增宽划痕,降低愈合率,上调E-cadherin表达,下调N-cadherin表达;在体内,miR-490-5p过表达减轻肿瘤重量,降低Ki67、Bax和caspase-3的表达,升高E-cadherin表达.结论:miR-490-5p靶向SP1抑制骨肉瘤细胞MG63生长和运动.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈路	川北医学院附属医院骨科	56	166	7.0	10.0
2	余孟英	川北医学院附属医院骨科	27	45	4.0	5.0
3	王金莲	川北医学院附属医院骨科	37	61	4.0	6.0
4	蒲劲松	川北医学院附属医院骨科	13	31	3.0	5.0