组蛋白去乙酰化酶2在衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用

• 作者: 吴凯 吴琪瑞 姜怡邓 李桂忠 杨勇 杨晓玲 柴丽芬 王睿 王艳华
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌细胞 衰老 自噬 HDAC2
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1157-1163
• 页数: 7页
• 分类号: R363|R541
• 字数: 5056字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2020.09.009

摘要

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在D-半乳糖(D-galactose)诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低中的作用.方法 使用D-galactose刺激大鼠心肌细胞H9c2衰老后,β-半乳糖苷酶染色验证模型是否成功;透射电镜观察未给予D-galactose对照(control)组与给予D-galactose组的自噬情况;Western Blot检测LC3B及p62的蛋白表达;分别采用qRT-PCR与Western Blot检测control组与D-galactose组HDAC2的mRNA与蛋白表达;同时,D-galactose组干扰HDAC2的表达后,Western Blot检测HDAC2的自身表达及LC3B与p62的蛋白表达,免疫荧光染色观察LC3B的定位及表达;最后,Western Blot检测control组与D-galactose组H3K14ac的蛋白表达;D-galactose组干扰HDAC2的表达后,Western Blot检测H3K14ac的蛋白表达.结果 成功复制了衰老心肌细胞模型;经过D-galactose干预后,细胞内的自噬结构较未干预组明显减少;Western Blot结果显示,LC3BⅡ/Ⅰ水平降低,p62表达升高;qRT-PCR与Western Blot结果均证实D-galactose组与control组相比HDAC2的mRNA和蛋白水平明显降低;干扰HDAC2的表达后,Western Blot结果显示干扰HDAC2后的D-galactose组(Ad-shHDAC2)与未干扰HDAC2的D-galactose组(Ad-shNC)相比,LC3BⅡ/Ⅰ水平降低,p62表达升高,免疫荧光染色结果显示Ad-shHDAC2与Ad-shNC相比LC3B荧光强度要低;Western Blot结果显示,D-galactose组H3K14ac水平与control组相比明显升高;干扰HDAC2的表达后,Western Blot结果显示Ad-shHDAC2组与Ad-shNC组相比,H3K14ac表达进一步增加.结论 D-galactose能够诱导衰老心肌细胞自噬水平降低,且HDAC2的表达降低介导H3K14高乙酰化水平可能是衰老心肌细胞自噬水平降低的重要机制之一.