牛支原体NOX2的原核表达及黏附特性

• 作者: 丁小琴 包世俊 朱彩宏 武小椿 温峰琴 薛惠文 邢小勇
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛支原体 nox2基因 原核表达 功能分析
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 2895-2902
• 页数: 8页
• 分类号: S852.62
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.11.028

摘要

旨在探究牛支原体(Mycoplasmabovis,Mb)NADH氧化酶NOX2的生物学功能,本研究参照GenBank中Mb湖北分离株(Mb Hubei-1 strain)nox2基因序列设计引物,应用PCR扩增获得Mb临洮分离株的nox2基因,在测序及序列优化的基础上,构建原核表达载体pET-nox2,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,进而对表达产物rM bNOX2的酶促活性、免疫原性,NOX2在M b内的分布,rM bNOX2抗血清的补体介导体外杀菌活性和对M b黏附宿主细胞的抑制活性进行了分析.结果表明,Mb临洮株nox2基因全长1350 bp,与GenBank中已知序列的Mb nox2基因序列比较,除Mb JF4278株相似性为97.93％ 外,其余均为99.93％.SDS-PAGE结果显示,优化的nox2基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白rM bNOX2相对分子质量约为67 ku,且具有良好的酶促活性;ELISA与Western blot结果显示,rMbNOX2具有良好的免疫原性,且Mb NOX2在细胞浆中的分布多于细胞膜;补体介导的体外杀菌试验及黏附抑制试验证实,rM bNOX2抗血清具有明显的补体介导杀支原体活性,并可有效抑制M b对宿主细胞的黏附.本研究为深入探讨M b NOX2生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢小勇		42	49	4.0	4.0
2	温峰琴		36	45	4.0	5.0
3	包世俊		43	52	4.0	5.0
4	武小椿		11	1	1.0	1.0
5	丁小琴		9	20	3.0	4.0
6	朱彩宏		1	0	0.0	0.0
7	薛惠文		4	0	0.0	0.0