miR-127-3p靶向MAPK4对肝癌HepG2细胞株生物学特性的影响

• 作者: 张玉蓉 徐国明 贾俊枝 郭红
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-127-3p MAPK4 肝癌HepG2细胞 生长转移
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 1330-1337
• 页数: 8页
• 分类号: R735.7
• 字数: 6353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.11.010

摘要

目的:探究miR-127-3p与MAPK4的靶向关系及其对肝癌HepG2细胞生长转移能力的影响.方法:生物信息预测miR-127-3p与MAPK4间靶向关系,荧光素酶实验验证,qRT-PCR检测两者在肝细胞中的基因表达.miR-127-3p mimic及pcDNA-MAPK4(pc-MAPK4)分别或同时转染HepG2细胞,qRT-PCR检测miR-127-3p表达,BrdU及Hoechst检测细胞增殖及凋亡,Transwell及划痕实验检测侵袭及迁移,Western blot(WB)检测Ki67、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、MMP-9、VEGF、MAPK4、MAPKAPK5、HSPB1表达.miR-127-3p mimic转染HepG2细胞后,建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录肿瘤体积,免疫组化及Tunel检测其增殖凋亡水平,WB检测MMP-9及MAPKAPK5表达.结果:与HL-7702比较,HepG2中miR-127-3p表达下调而MAPK4上调.HepG2中,miR-127-3p mimic上调miR-127-3p并下调MAPK4表达及MAPK4 wt荧光素酶活性,pc-MAPK4上调MAPK4并减弱miR-127-3p mimic的作用;miR-127-3p mimic减少BrdU阳性细胞及Ki67、Bcl-2表达,增加凋亡细胞及Bax、cleaved Caspase-3表达,pc-MAPK4增加BrdU阳性细胞及Ki67、Bcl-2表达,减少凋亡细胞及Bax、cleaved Caspase-3表达,减弱miR-127-3p mimic的抑增殖促凋亡作用;miR-127-3p mimic减少侵袭细胞数、划痕闭合率及MMP-9、VEGF表达,pc-MAPK4增加侵袭细胞数、划痕闭合率及MMP-9、VEGF表达并减弱miR-127-3p mimic的抗侵袭迁移作用;miR-127-3p mimic降低MAPKAPK5及HSPB1磷酸化比值,pc-MAPK4升高其比值并减弱miR-127-3p mimic的影响.miR-127-3p mimic减小HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤体积,减少组织中Ki67阳性细胞、MMP-9表达及MAPKAPK5磷酸化比值并增加凋亡细胞.结论:miR-127-3p靶向MAPK4可抑制肝癌HepG2细胞生长及转移.