禽呼吸道7种病毒多重连接探针扩增检测技术的建立与应用

• 作者: 周莹珊 陈琳 周柯 王雨萌 邵春艳 杨永春 黄保续 王晓杜 宋厚辉
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 多重连接探针扩增技术(MLPA) 禽呼吸道病毒 AIV NDV aMPV IBV ILTV 多重PCR
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 2311-2315,2319
• 页数: 6页
• 分类号: S851.3|S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.12.06

摘要

建立了一种多重连接探针扩增技术(MLPA),能快速区分临床上引起禽呼吸道疾病的7种病原,即禽流感病毒(AIV)H9亚型、AIV H5亚型、AIV H7亚型、新城疫病毒(NDV)、禽偏肺病毒(aMPV)、禽传染性支气管炎病毒(IBV)和禽传染性喉气管炎病毒(ILTV).对扩增产物进行毛细管电泳分析,结果显示,该方法对不同病原核酸的最低检测极限可以达到5.3×100～1.40×102拷贝/反应,特异性好,探针之间无交叉反应.应用MLPA方法对122份临床样品进行检测,并与国家或行业标准进行比较,结果显示AIV H7亚型、NDV、aMPV、IBV、ILTV的特异性和敏感性均达到100％.结果与国家或行业标准PCR方法的检测结果一致性高,且克服了国家或行业标准PCR方法无法进行多重检测的缺点.该方法最多可同时检测40多种病原,对于复杂症候群的快速和高通量检测具有重要临床意义,可推广到其他多重病毒的检测中,显示出广阔的应用前景.