多重连接探针扩增(MLPA)技术同时检测五种病毒的研究

• 作者: 乔彩霞 刘全国 史喜菊 张伟 李冰玲 李炎鑫 郭志红 马贵平
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 多重连接探针扩增(MLPA)技术 5种病毒 同时检测
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 技术改进
• 页码范围: 745-752
• 页数: 8页
• 字数: 4462字
• 语种: 中文

摘要

现有的动物疫病诊断技术多是针对单一病原进行的,而动物疫病的流行却出现了多种病毒混合感染,现有诊断技术不能很好地满足国境口岸快速、高通量检疫的需求,动物疫病多重检测新技术的研究近来已经成为动物疫情监测、疫病控制领域关注的焦点.本研究利用多重连接探针扩增(MLPA)技术特异、敏感、高通量等技术优势,以猪流感病毒(SIV)、伪狂犬病病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪传染性胃肠炎(TGEV)和猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)为研究对象,分别设计了这5种病毒的MLPA探针,将这5种探针混合,建立了可以同时检测这5种病毒的MLPA扩增方法.方法特异性试验表明,针对每种病毒的探针都只能扩增出其对应的病毒模板,其余病毒模板的扩增都是阴性结果；而且,5种探针混合物都只能从单个目的病毒中扩增出单一的特异性条带,而猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的扩增均为阴性.敏感性试验结果表明,5重MLPA扩增的最低检测限可以达到单个病毒核酸3000～6000个拷贝.本研究建立的5种病毒MLPA检测方法在国内外首次实现一次采样,一次分析,检测5种猪病的目的,该技术特异性强,敏感性高,加之其多重性检测优势,有望成为未来疫病检测的新方向.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马贵平		50	217	7.0	13.0
2	李冰玲		36	136	6.0	10.0
3	史喜菊		37	137	6.0	10.0
4	刘全国		28	118	6.0	10.0
5	李炎鑫		31	116	5.0	10.0
6	郭志红		13	84	6.0	8.0
7	张伟		48	119	7.0	8.0
8	乔彩霞		27	128	7.0	9.0