miRNA-574-5p通过靶基因高温需求因子A1调控肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制

• 作者: 卢文杰 朱琼琼 董贤明 陈雅宁
• 来源期刊: 癌症进展
• 学科: 医学
• 关键词: miRNA-574-5p 高温需求因子A1 肝癌 增殖 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 570-575
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 6555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11877/j.issn.1672-1535.2020.18.06.10

摘要

目的 探讨微小RNA(miRNA)-574-5p通过靶基因哺乳动物高温需求因子A1(HTRA1)调控肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测正常细胞株L02及肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721、BEL-7402中miRNA-574-5p、HTRA1的表达水平,采用Western blot检测转染后HepG2细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、MMP14蛋白的表达水平,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,采用双荧光素酶实验检测miRNA-574-5p对HTRA1活性的影响.结果 与L02细胞系比较,肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、BEL-7402中miRNA-574-5p的表达水平均升高,HTRA1 mRNA和HTRA1蛋白的表达水平均下降(P﹤0.05).anti-miRNA-574-5p组HepG2细胞中miRNA-574-5p的表达水平明显低于anti-miRNA-NC组(P﹤0.01).与anti-miRNA-NC组比较,anti-miRNA-574-5p组HepG2细胞48、72 h的增殖率及cyclin D1、MMP2、MMP9、MMP14蛋白的表达水平均明显降低,迁移、侵袭数目均明显减少,p21、p27蛋白的表达水平均明显升高(P﹤0.01).pcDNA-HTRA1组HepG2细胞中HTRA1蛋白的表达水平明显高于pcDNA组(P﹤0.01).与pcD-NA组比较,pcDNA-HTRA1组HepG2细胞48、72 h的增殖率及cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白的表达水平均明显降低,p21蛋白的表达水平明显升高,迁移、侵袭数目均明显减少(P﹤0.01).双荧光素酶报告实验显示,miRNA-574-5p+WT-HTRA1组HepG-2细胞的荧光素酶活性明显低于miRNA-NC+WT-HTRA1组(P﹤0.01).miRNA-574-5p+MUT-HTRA1组HepG-2细胞的荧光素酶活性与miRNA-NC+MUT-HTRA1组比较,差异无统计学意义(P﹥0.05).与anti-miRNA-574-5p+si-NC组比较,anti-miRNA-574-5p+si-HTRA1组HepG2细胞中HTRA1蛋白的表达水平降低,培养48、72 h的肝癌HepG2细胞的增殖率均升高,cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白的表达水平均升高,细胞迁移、侵袭数目均增多,p21蛋白的表达水平降低(P﹤0.05).结论 miRNA-574-5p通过靶向负调控HTRA1基因调控肝癌细胞的增殖、侵袭、迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱琼琼	河南省第二人民医院消化内科	1	0	0.0	0.0
2	陈雅宁	河南省第二人民医院消化内科	1	0	0.0	0.0
3	卢文杰	河南省第二人民医院消化内科	2	0	0.0	0.0
4	董贤明	河南省第二人民医院呼吸内科	1	0	0.0	0.0