过表达miR-125a-5p靶向STAT3抑制结肠癌体外生长和治疗移植瘤裸鼠的研究

• 作者: 周真真 曾俊涛 王小红 阚娜 高蕾
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-125a-5p STAT3 抑制 结肠癌细胞SW480
• 年，卷（期）: 2020,（22）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 2731-2736
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.22.009

摘要

目的:探究过表达miR-125a-5p抑制结肠癌的机制及其对移植结肠癌裸鼠的影响及机制.方法:通过基因预测软件TargetScan、miRanda和TarBase筛选出miR-125a-5p的靶基因STAT3;miR-125a-5p mimic和pcDNA-STAT3转染SW480细胞;RT-PCR检测miR-125a-5p表达,Western blot检测STAT3、Ki67、caspase-3、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Bcl-2、c-Myc和cycD表达,克隆形成实验检测细胞生长,Transwell实验检测细胞侵袭,倒置显微镜观察上皮-间质细胞形态变化;裸鼠皮下注射转染miR-125a-5p mimic的结肠癌SW480细胞构建模型,30 d后检测肿瘤重量,免疫组化检测Ki67、Vimentin表达,RT-PCR检测miR-125a-5p表达,Western blot检测Bcl-2、c-Myc和cycD表达.结果:miR-125a-5p与STAT3在3′UTR区存在结合位点,荧光素酶实验证实miR-125a-5p靶向作用于STAT3,对STAT3表达起抑制作用;在体外,与Control组相比,miR-125a-5p mimic组克隆形成率显著降低,Ki67表达显著下调,caspase-3表达显著上调,侵袭细胞数显著减少,E-cadherin表达显著上调,Vimentin和N-cadherin表达显著下调,Bcl-2、c-Myc和cycD表达显著下调;在体内,与Control组相比,miR-125a-5p mimic组肿瘤重量显著减轻,miR-125a-5p、Bcl-2、c-Myc和cycD表达显著下调,Ki67和Vimentin阳性率显著减少.结论:过表达miR-125a-5p可靶向STAT3抑制结肠癌SW480细胞增殖、侵袭和上皮间质转化,诱导其凋亡,并抑制STAT3下游靶基因Bcl-2、c-Myc和cycD表达,从而抑制结肠癌.