模板法制备多孔交联脂肪酶聚集体碳酸钙及其特性

• 作者: 吕鹏梅 李惠文 杨玲梅 王忠铭 罗文 苗长林
• 来源期刊: 农业工程学报
• 学科: 工学
• 关键词: 催化剂 酶 交联酶聚集体 脂肪酶 固定化 碳酸钙 多孔
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 农业生物环境与能源工程
• 页码范围: 218-226
• 页数: 9页
• 分类号: TE667
• 字数: 9216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11975/j.issn.1002-6819.2020.03.027

摘要

针对传统交联脂肪酶聚集体(cross-linked lipase aggregates,CLEAs)表面密实、比表面积小、无太多孔隙结构、在催化过程中存在扩散限制、影响酶催化效率等问题,该文通过脂肪酶、氯化钙、碳酸钠、硫酸铵共沉淀制备脂肪酶/碳酸钙微球,再加入二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)进行脂肪酶交联自组装,然后用乙二胺四乙酸二钠(EDTA)去除碳酸钙模板剂,制得多孔交联脂肪酶聚集体微球(p-CLEAs),对其制备条件、结构特征、酶学性质进行研究.结果表明,最佳制备条件为:Ca2+浓度0.35 mol/L、脂肪酶与Ca2+比例5:1、沉淀剂饱和度80％、沉淀pH值为8、沉淀时间45 min、DTT体积分数0.2％、交联时间40 min.与常规CLEAs相比,所制备的p-CLEAs在甲醇耐受性、热稳定性和pH值稳定性方面均有明显改善,4℃保藏6个月,仍保持较高的活性.其结构稳定,形貌、孔道尺寸可调控,呈多孔结构,这种多孔结构使得底物分子更容易进入脂肪酶的活性位点,不仅降低了传质限制,还提高了催化效率,具有较高的催化活性.