PC12细胞氧糖剥夺不同时间段再灌注后内质网应激及细胞凋亡

• 作者: 刘雨霞 吴昌学 官志忠 张文萍 李毅 肖雁 郑菊 齐晓岚
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PC12细胞 氧糖剥夺再灌注 内质网应激 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1297-1301
• 页数: 5页
• 分类号: R743|R34-33
• 字数: 4293字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2020.06.057

摘要

目的 观察大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12细胞)细胞氧糖剥夺(OGD)不同时间段再灌注(OGD/R)后内质网应激及凋亡的变化,探讨神经元OGD再灌注所致内质网应激与凋亡的关系.方法 利用无糖DMEM及三气培养箱对PC12细胞进行OGD,不同时间段OGD后恢复正常培养24 h,根据不同OGD时间段,将细胞分为五组:control、3 h/24 h、6 h/24 h、9 h/24 h、12 h/24 h,OGD/R相应时间后,采用Western印迹检测内质网相关蛋白分子伴侣葡萄糖调节蛋白(GRP)78、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3的表达,免疫荧光方法检测GRP78蛋白的表达情况,并利用流式细胞仪检测凋亡率.结果 OGD/R后,与control组相比,6 h/24 h、9 h/24 h、12 h/24 h组细胞中GRP78蛋白及caspase-3蛋白的表达水平明显增加(P<0.01,P<0.05),而PERK蛋白在各组中无明显变化.用Spearman相关性分析结果显示,capase-3蛋白与GRP78蛋白表达水平成呈正相关(R=0.561,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,与control组相比,各组的凋亡率明显增高(P<0.01).结论 PC12细胞OGD/R后内质网应激及凋亡呈动态变化,且内质网应激蛋白GRP78与凋亡蛋白caspase-3的表达水平有关,这将对缺血再灌注后神经元损伤的研究具有一定的意义.