地黄毛蕊花糖苷合酶基因的克隆、亚细胞定位与表达特性分析

• 作者: 左鑫 智惊宇 李欣容 李铭铭 杨超飞 王丰青 谢彩侠
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 地黄 毛蕊花糖苷合酶 序列分析 亚细胞定位 qRT-PCR
• 年，卷（期）: 2020,（18）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 4739-4746
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2020.18.018

摘要

目的 克隆地黄Rehmannia glutinosa毛蕊花糖苷合酶基因(RgAcS1),分析其亚细胞定位和表达模式.方法 在地黄的转录组数据库中通过注释和比对,获得地黄RgAcS1的cDNA序列,利用聚合酶链式反应(PCR)方法进行分子克隆.构建绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,以农杆菌瞬时表达法观测RgAcS1的亚细胞定位.利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测RgAcS1基因在地黄块根不同部位的表达模式.结果 获得地黄1个莽草酸-O-羟基肉桂酰基转移酶的全长编码序列,cDNA长度为1 659 bp,包含1个1 296bp的开放阅读框,编码431个氨基酸残基,蛋白质相对分子质量为475 900,具有莽草酸-O-羟基肉桂酰基转移酶的典型结构域,命名为RgAcS1.亚细胞定位结果显示RgAcS1主要分布在细胞质中,在细胞核中也有分布.qRT-PCR分析表明,RgAcS1在地黄的周皮和根毛中表达量较高,在木质部和韧皮部表达量较低.RgAcS1基因在地黄品种北京1号、QH1和85-5中非菊花心中表达量均高于菊花心中的表达量,且差异达极显著水平.结论 获得地黄RgAcS1的cDNA序列,明确了RgAcS1的亚细胞定位和时空表达模式,为进一步研究RgAcS1基因在毛蕊花糖苷合成过程中的作用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢彩侠	河南中医药大学药学院	94	284	9.0	12.0
2	王丰青	河南农业大学农学院	34	188	8.0	12.0
3	杨超飞	河南农业大学农学院	6	43	3.0	6.0
4	李欣容	河南农业大学农学院	3	0	0.0	0.0
5	智惊宇	河南农业大学农学院	6	8	2.0	2.0
6	李铭铭	河南农业大学农学院	1	0	0.0	0.0
7	左鑫	河南农业大学农学院	1	0	0.0	0.0