长链非编码RNA LINC00478抑制微小RNA-214对口腔鳞癌细胞顺铂耐药性的影响

• 作者: 李冠睿 李建武 颜家渝
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 长链非编码RNALINC00478 miR-214 口腔鳞癌 顺铂耐药性 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 页码范围: 19-25,70
• 页数: 8页
• 分类号: R739.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.11778/j.jdxb.2021.01.003

摘要

目的:探讨长链非编码RNA LINC00478对口腔鳞癌细胞顺铂耐药性的影响及其对微小RNA-214(miR-214)的靶向调控作用.方法:采用qRT-PCR法检测口腔鳞癌组织、癌旁组织中LINC00478、miR-214的表达量;体外培养口腔鳞癌细胞CAL-27,建立顺铂耐药性细胞CAL-27/DDP,分别将pcDNA、pcDNA-LINC00478、pcDNA-LINC00478与miR-NC、pcDNA-LINC00478与miR-214 mimics转染至CAL-27/DDP细胞;采用qRT-PCR法检测CAL-27细胞与CAL-27/DDP细胞中LINC00478、miR-214的表达量;MTT法与克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测LINC00478、miR-214的靶向关系;Western blot法检测Ki67、Pro-caspase3、Cleaved-caspase3蛋白表达量.结果:与癌旁组织比较,口腔鳞癌组织LINC00478的表达水平显著降低(P<0.05),miR-214的表达水平显著升高(P<0.05);与CAL-27组比较,CAL-27/DDP组LINC00478的表达水平显著降低(P<0.05),miR-214的表达水平显著升高(P<0.05);与转染pcDNA比较,CAL-27/DDP细胞中转染pcDNA-LINC00478可提高增殖抑制率、凋亡率及Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05),减少克隆形成数(P<0.05),降低Ki67、Pro-caspase3蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC00478能够靶向调控miR-214的表达及活性;与共转染pcDNA-LINC00478与miR-NC比较,共转染pcDNA-LINC00478与miR-214 mimics可降低增殖抑制率、凋亡率及Cleaved-caspase3蛋白水平(P<0.05),增加克隆形成数(P<0.05),提高Ki67、Pro-caspase3蛋白水平(P<0.05).结论:LINC00478通过靶向抑制miR-214的表达而抑制口腔鳞癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,从而降低细胞顺铂耐药性.