不饱和脂肪酸对人脂肪间充质干细胞生物学特性的影响

• 作者: 李锦灵 林立龙 李治寰
• 来源期刊: 生命科学研究
• 关键词: 脂肪间充质干细胞(ADSCs) 不饱和脂肪酸 油酸 亚麻酸 生物学特性
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 细胞与生理学|CELL AND PHYSIOLOGY
• 页码范围: 15-23,52
• 页数: 10页
• 分类号: Q25
• 语种: 中文
• DOI: 10.16605/j.cnki.1007-7847.2020.03.0133

摘要

探讨不饱和脂肪酸对人脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的形态、增殖、免疫表型及分化潜能的影响.采用0.15％Ⅷ型胶原酶消化法从皮下脂肪组织中分离获得ADSCs,使用添加了油酸或亚麻酸的培养基对ADSCs进行传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态,计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面抗原,同时使用特定的诱导培养基对细胞进行成脂、成骨、成软骨诱导培养和染色鉴定,并采用实时定量PCR检测三系分化诱导培养9 d后成脂、成骨及成软骨相关标志基因mRNA的表达水平.结果显示,0.15％Ⅷ型胶原酶消化法能获得形态均一的ADSCs;培养相同的时间后,与未添加脂肪酸的空白对照组相比,含有20 μmol/L油酸或亚麻酸的培养体系所收获ADSCs的细胞数量增加了 20％左右;各组细胞CD13、CD29、CD44、CD73、CD90、CD105呈阳性表达,CD31、CD45呈阴性表达;使用20 μmol/L油酸或亚麻酸进行传代培养的细胞经成脂、成骨、成软骨诱导后,油红O、茜素红、阿利新蓝染色呈阳性反应,同时细胞中的成脂标志基因PPAR-γ、成软骨标志基因SOX9和COL2A1及成骨标志基因ALP、OCN、RUNX2的mRNA表达水平较对照组显著增加.实验结果表明,油酸及亚麻酸能够促进ADSCs增殖,维持细胞的免疫表型,并且提高细胞的三系分化潜能.