lncRNA TINCR靶向调控miR-221抑制大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

• 作者: 李雨弥 章培 唐勇 谷子 张文勇
• 来源期刊: 河北医学
• 关键词: 心肌细胞 长链非编码RNA 组织分化诱导非蛋白编码 细胞凋亡 微小RNA-221
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 195-201
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6233.2021.02.005

摘要

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)组织分化诱导非蛋白编码(TINCR)通过靶向调控微小RNA(miR)-221表达对大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法:将体外培养大鼠心肌细胞分为对照组(正常培养)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空载体)和TINCR组(转染pcDNA3.1-TINCR过表达载体),实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测TINCR和miR-221的表达,双荧光素酶报告基因实验检测TINCR与miR-221的靶向结合关系,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,免疫印迹法检测细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达;将miR-221模拟物或抑制剂转染至心肌细胞,分析心肌细胞凋亡变化;将miR-221模拟物与pcDNA3.1-TINCR过表达质粒共转染至心肌细胞中,观察miR-221对TINCR过表达的心肌细胞活力和凋亡的影响.结果:与对照组比较,TINCR组细胞中miR-221表达水平、细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平明显降低,而细胞存活率和Bcl-2蛋白的表达水平明显升高(P<0.05),但pcDNA3.1组与对照组比较各指标差异均无统计学意义(P>0.05).双荧光素酶报告基因实验证实TINCR可与miR-221靶向结合.与miR-NC组比较,miR-221组细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平明显升高,Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);anti-miR-221组的实验结果与之相反.上调miR-221表达后,TINCR过表达对心肌细胞活力和凋亡的作用明显得到逆转(P<0.05).结论:lncRNA TINCR可通过靶向调控miR-221表达抑制心肌细胞凋亡.