NCTD通过靶向Hedgehog/SOX2 axis抑制急性髓系白血病HL60细胞的增殖

• 作者: 付明燕 陈微微 高娜 李硕 杜静 于文征
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 去甲斑蝥素 Hedgehog信号通路 白血病 SOX2 HL60
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 白血病基础与临床
• 页码范围: 32-37
• 页数: 6页
• 分类号: R733.71
• 语种: 中文
• DOI: 10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2021.01.005

摘要

目的:研究去甲斑蝥素(NCTD)通过抑制Hedgehog信号通路(SHH)关键调节因子及其下游转录因子SOX2对急性髓系白血病细胞增殖的影响.方法:HL60和NB4细胞系经NCTD、SMO和GLI1抑制剂培养24 h后,用CCK8检测细胞数目;HL60细胞系经NCTD处理后,利用免疫印迹法检测GLI1、SMO、SOX2的表达情况;将表达GLI1或SOX2的pcDNA3.1质粒转染至HL60细胞,空载体pcDNA3.1和pcDNA 3.1-EGFP分别作为阴性、阳性对照;免疫印迹法检测外源性GLI1、SOX2的表达水平,CCK8检测HL60细胞生长曲线及数目的变化;基因修饰的HL60细胞系经不同浓度NCTD作用后检测HL60细胞增殖情况.结果:NCTD,SMO及GLI1抑制剂以剂量依赖的方式抑制NB4/HL60细胞的增殖.与二甲基亚砜溶剂处理的对照组相比,NCTD可以显著降低SMO、GLI1和SOX2的蛋白水平.与pcDNA3.1空载体转染组相比,GLI1和SOX2在HL60细胞中过表达.生长曲线证实,GLI1/SOX2具有显著增殖优势.CCK8检测表明GLI1/SOX2过表达的HL60细胞对NCTD更具耐药性.结论:NCTD可通过靶向Hedgehog/SOX2 aixs抑制HL60的增殖.