二甲双胍调控自噬减轻高糖诱导滋养层细胞损伤的实验研究

• 作者: 相萌 张旭东 赵巧 赵宗霞
• 来源期刊: 河北医学
• 关键词: 二甲双胍 高糖 滋养层细胞 自噬
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 211-217
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6233.2021.02.008

摘要

目的:探究二甲双胍对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响,并初步研究其作用机制.方法:体外培养人绒毛膜滋养层HTR8-SVneo细胞,建立高糖损伤模型,随机分为对照组、模型组、二甲双胍I组、二甲双胍Ⅱ组及二甲双胍Ⅲ组.噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活率变化情况;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)法检测各组细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测转染后各组细胞自噬相关基因7(ATG7)、Beclin-1 mRNA表达情况;蛋白印迹分析法检测各组细胞ATG7、Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)、核孔蛋白62(p62)蛋白表达情况.结果:高糖诱导模型最适浓度为:30mmoL/L.与对照组相比,模型组HTR8-SVneo细胞存活率、p62蛋白表达水平显著降低(P<0.05),凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1、ATG7 mRNA及蛋白表达量显著升高(P<0.05),与模型组相比,二甲双胍I组、二甲双胍Ⅱ组及二甲双胍Ⅲ组HTR8-SVneo细胞存活率、p62蛋白表达水平依次升高(P<0.05),呈剂量依赖性,细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1、ATG7 mRNA及蛋白表达量依次降低(P<0.05),呈剂量依赖性.结论:二甲双胍可能通过抑制高糖诱导的人绒毛膜滋养层细胞自噬,减轻细胞损伤.