基于CRISPR/Cpf1系统下的诱导型多基因激活体系的建立

• 作者: 黄秋月 李中瀚 殷旖珂
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: CRISPR/Cpf1系统 诱导性 多基因激活
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 160-164
• 页数: 5页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.19907/j.0490-6756.2021.016003

摘要

为开发高效率的内源多基因激活工具,利用CRISPR/Cpf1系统能够促使pre-crRNA中多个crRNA自我剪切和释放的特性,将As/Fn/LbCpf1的核酸酶区域定点突变形成dCpf1,并在C端和N端分别引入了VPR三元转录激活域和不稳定结构域(DD-domain)、四环素控制的操纵子,构建了T RE3G-DD-dCpf1-V PR激活系统.结果显示,Oct4基因的转录水平提升高达104倍,且Myod1、Oct4基因的转录水平分别在Dox和TMP单药的控制下,能够实现不同程度的转录水平的提升,在加双药的条件下Myod1、Oct4基因可分别提高80、120多倍.证明该系统能够通过靶向DNA快捷、高效的进行诱导内源性多基因激活.