谷氨酸棒状杆菌CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统优化

• 作者: 张德志 王婷 蔡柠匀 赵桂红 陈宁 马洪坤
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: CRISPR-Cpf1 ssDNA 谷氨酸棒状杆菌 优化 基因组编辑
• 年，卷（期）: 2019,（19）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 字数: 3850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021520

摘要

谷氨酸棒状杆菌作为重要的微生物细胞工厂,基因组修饰已经成为调节目标代谢物的首要途径.为了提高基因定点突变的编辑效率,建立了高效省时的CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统.利用卡那霉素抗性作为筛选标记,构建了1株严谨的单链模式菌M-1,用于验证与统计编辑效率.首先,采用强启动子Ptuf,优化了切割效率;其次,利用重组酶RecT和合理长度与添加量的ssDNA,优化了重组效率.实验结果显示:在启动子Ptuf和RecT的双重作用下,采用滞后链(70 bp、12.5 μg)优化组合方式,使基因编辑效率提升至(80±5.7)％.由RecT介导的CRISPR-Cpf1/ssDNA基因组编辑系统可在很大程度上加快谷氨酸棒状杆菌代谢工程改造.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王婷	天津科技大学生物工程学院	20	63	4.0	7.0
2	蔡柠匀	天津科技大学生物工程学院	2	0	0.0	0.0
3	张德志	天津科技大学生物工程学院	2	0	0.0	0.0
4	赵桂红	天津科技大学生物工程学院	2	0	0.0	0.0
5	马洪坤	天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0