miR-432与 IDH野生型胶质瘤的细胞增殖迁移、患者总生存期及 TRIM38基因表达的关系

• 作者: 董瑜 陆南 刘玉河 殷安安
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 关键词: 神经胶质瘤 微小RNA-432 异柠檬酸脱氢酶 三基序蛋白质38基因
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 神经胶质瘤
• 页码范围: 126-132
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115354-20200403-00247

摘要

目的:探讨微小RNA(miR)-432与异柠檬酸脱氢酶( IDH)野生型胶质瘤的细胞增殖迁移、患者总生存期及三基序蛋白质38( TRIM38)基因表达的关系。 方法:(1)下载中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中198例胶质瘤患者(81例 IDH突变型、106例 IDH野生型、11例未知型)的临床资料、miRNA表达芯片数据及5例非肿瘤对照脑组织样本的miRNA表达芯片数据，比较miR-432在不同 IDH突变状态的胶质瘤亚型间及与非肿瘤对照样本间的表达差异。依据 IDH野生型胶质瘤样本中miR-432表达水平的中位值，将患者分为miR-432高表达组( n=51)与miR-432低表达组( n=53)，采用Kaplan-Meier生存分析比较2组间总生存期的差异。采用单因素Cox回归分析和多因素Cox回归分析筛选 IDH野生型胶质瘤患者总生存期的影响因素。应用Pearson相关性分析检验 IDH野生型胶质瘤样本中miR-432与 TRIM38基因表达水平的关系。(2)体外培养人胶质瘤细胞系U251，并分为miR-432无义序列对照组和miR-432类似物组。采用细胞计数试剂(CCK)-8法检测2组细胞培养第1~5天时的活性，采用Transwell小室实验检测2组细胞的迁移能力，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组细胞中 TRIM38 mRNA的表达水平。(3)分别将野生型及突变型含TRIM38 3'-末端非翻译区(3'-UTR)的pGL3荧光报告载体结合miR-432无义序列、miR-432类似物转染U251细胞，分为miR-432无义序列+野生型TRIM38 3'-UTR组、miR-432类似物+野生型TRIM38 3'-UTR组、miR-432无义序列+突变型TRIM38 3'-UTR组及miR-432类似物+突变型TRIM38 3'-UTR组，并应用酶标仪检测各组细胞的荧光素酶活性。 结果:(1)与 IDH突变型胶质瘤样本相比， IDH野生型胶质瘤样本中miR-432的表达水平明显降低，差异有统计学意义( P<0.05)。miR-432低表达组的总生存期较miR-432高表达组明显缩短，差异有统计学意义( P<0.05)。患者的年龄、肿瘤级别及miR-432表达分组与 IDH野生型胶质瘤患者的总生存期相关( P<0.05)，但miR-432表达分组并不是患者总生存期的独立影响因素( P>0.05)。 IDH野生型胶质瘤样本中miR-432与 TRIM38 mRNA的表达水平呈负相关关系( r=-0.255， P=0.018)。(2)与无义序列对照组比较，miR-432类似物组培养第2~5天时的细胞活性明显降低，迁移细胞数目明显减少， TRIM38 mRNA表达水平明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。(3)miR-432类似物+野生型TRIM38 3'-UTR组的荧光素酶活性明显低于miR-432无义序列+野生型TRIM38 3'-UTR组细胞，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:miR-432在 IDH野生型胶质瘤组织中表达降低，且与患者的预后不良有关；过表达miR-432能够抑制胶质瘤细胞的增殖迁移能力，这或许与其能特异性结合 TRIM38基因并干扰该基因表达有关。