利用家蚕杆状病毒表达系统表达人γ干扰素及产物的抗病毒活性检测

• 作者: 曾振 李家磊 刘兴健 唐平 李轶女 张志芳 沈兴家 易咏竹
• 来源期刊: 蚕业科学
• 关键词: 人γ扰素 杆状病毒表达系统 家蚕 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Research Papers
• 页码范围: 240-246
• 页数: 7页
• 分类号: Q786|Q511
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2021.03.005

摘要

干扰素-γ(IFN-γ)是免疫反应中重要的免疫调节因子,对多种免疫细胞具有激活作用.利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕中高效表达具有活性的人γ干扰素(hIFN-γ),首先根据家蚕密码子偏好性对hIFN-γ的编码基因进行优化合成,将优化合成后的序列克隆到杆状病毒转移载体pBR中,然后与orf1629基因缺失的失活拯救型杆状病毒BmBacmid共转染BmN细胞,获得重组病毒reBmBac-hIFN-γ,最后利用获得的重组病毒感染家蚕并收获表达产物.采用微量细胞病变抑制法,在Vero/VSV-GFP系统中检测到重组hIFN-γ 的效价达到(3.69±2.02)×106 IU/mL.此外,重组hIFN-γ可以抑制猪蓝耳病病毒(PRRSV)在Marc-145细胞中的增殖.上述结果为利用家蚕生物反应器高效生产具有活性的人γ干扰素奠定了试验基础.