柴胡皂苷d对H2O2诱导的肝细胞损伤的保护作用及其机制

• 作者: 黄小凤 刘泽干 雷攀 孟忠吉 王莉博 杜士明
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 关键词: 柴胡皂苷-d 非酒精性脂肪性肝病 核因子E2相关因子2 血红素氧合酶1 氧化应激
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 论著|ORIGINAL ARTICLES
• 页码范围: 169-175
• 页数: 7页
• 分类号: R285
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2021.03.002

摘要

目的 探讨柴胡皂苷d(SSd)对H2O2诱导L02细胞保护作用及机制.方法 ①L02细胞分别用SSd 0.5,1和2μmol·L-1预处理6 h,加H2O2800μmol·L-1处理24 h,同时设细胞对照和H2O2800μmol·L-1(模型)组;MTT法检测细胞存活率,生化检测法检测细胞上清液中谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性及丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量.②L02细胞分别用SSd 2μmol·L-1和特丁基对苯二酚(tBHO)50μmol·L-1预处理6 h,加H2O2800μmol·L-1处理24 h,同时设细胞对照、模型和单独SSd 2μmol·L-1组;荧光探针分析法检测细胞内活性氧(ROS)积累,免疫荧光法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)核转位水平,Western印迹法检测Nrf2和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达水平.结果 ①MTT结果显示,与细胞对照组相比,模型组细胞存活率显著下降(P<0.05),与模型组相比,模型+SSd 1和2μmol·L-1组细胞存活率显著升高(P<0.05);生化检测结果显示,与细胞对照组相比,模型组GPT和GOT活性及MDA和LDH含量均显著升高(P<0.05);与模型组相比,模型+SSd 2μmol·L-1组GPT和GOT活性及MDA和LDH含量均显著降低(P<0.05).②ROS检测结果显示,与细胞对照组相比,模型组ROS显著升高(P<0.05);与模型组相比,模型+SSd 2μmol·L-1组显著降低(P<0.05);免疫荧光结果显示,模型+SSd 2μmol·L-1组Nrf2主要定位于细胞核中;Western印迹结果显示,模型组细胞核及细胞质中的Nrf2蛋白及HO-1蛋白表达水平没有显著提升;与模型组相比,模型+SSd 2μmol·L-1组以及模型+tBHQ 50μmol·L-1组Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著增强(均P<0.05);与细胞对照组及模型组相比,单独SSd 2μmol·L-1组可以显著提高L02细胞中Nrf2和HO-1蛋白表达(P<0.05).结论 SSd能有效保护H2O2诱导的L02细胞损伤,其机制与降低细胞内ROS含量,上调Nrf2和HO-1蛋白表达有关.