细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)敲除和人源化小鼠模型的建立

• 作者: 黄艺滢 张文龙 石桂英 雷雪裴 高苒 白琳
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 关键词: 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 人源化 基因敲除 小鼠
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 307-315
• 页数: 9页
• 分类号: Q95-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2021.03.005

摘要

目的 建立细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)基因人源化小鼠模型,为靶向CTLA4的肿瘤治疗性抗体研发和筛选提供有效的小鼠模型.方法 利用CRISPR/Cas9技术,建立CTLA4基因人源化和敲除小鼠模型,利用PCR、RT-PCR、Western Blot、免疫组织化学和流式细胞术的方法对其进行鉴定及分析.将小鼠黑色素瘤细胞株(B16)注射到CTLA4人源化小鼠皮下,观察腹腔注射CTLA4单克隆抗体伊匹木(ipilimumab)的抗肿瘤效果.结果 CTLA4人源化小鼠可以稳定表达人源CTLA4,而不表达鼠源CTLA4.CTLA4人源化小鼠出生后6个月内正常存活,组织病理学及免疫系统未见明显异常.同时在CTLA4人源化小鼠中,伊匹木减缓肿瘤生长速度.CTLA4基因敲除小鼠不表达CTLA4基因,在出生后3～5周内由于自身免疫疾病死亡.结论 同时建立了CTLA4人源化和敲除小鼠.CTLA4人源化小鼠可用于筛选与CTLA4基因相关的治疗性抗体或药物.