miR-183靶向CX3CL1基因调控肝癌细胞MICA/B表达和增加NK细胞对肝癌细胞杀伤作用

• 作者: 靳海科 刘意 武卫
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 关键词: miR-183 CX3CL1 肝癌 MICA/B 自然杀伤细胞 杀伤作用
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 192-201
• 页数: 10页
• 分类号: R392
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20210029

摘要

目的 探讨miR-183对肝癌细胞MHC-I类相关蛋白A/B(MICA/B)表达和自然杀伤(NK)细胞杀伤作用影响及其分子机制.方法 实验设置miR-con组、miR-183组、anti-miR-con组、anti-miR-183组、pcDNA组、pcDNA-CX3CL1 组、anti-miR-183+si-con组、anti-miR-183+CX3CL1组、对照(NC)组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-183和CX3CL1 mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测CX3CL1、MICA和MICB蛋白表达;流式细胞术检测肝癌细胞表面MICA/B的表达;NK细胞与肝癌细胞共培养后,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测NK细胞对肝癌细胞的杀伤作用;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测肝癌细胞与NK细胞共培养后培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素γ(IFN--γ)水平;荧光素酶报告实验检测miR-183和CX3CL1的靶向关系.结果 肝癌组织和肝癌细胞中miR-183高表达,CX3CL1、MICA和MICB低表达.干扰miR-183表达和过表达CX3CL1,肝癌细胞中MICA、MICB阳性表达率显著升高,与NK细胞共培养后TNF-α和IFN-γ水平显著升高,NK细胞对肝癌细胞的杀伤率显著升高(P＜0.05).miR-183靶向调控CX3CL1,沉默CX3CL1逆转了干扰miR-183对肝癌细胞MICA/B表达和NK细胞杀伤作用的影响.结论 抑制表达miR-183可增加肝癌细胞MICA/B表达,增加NK细胞对肝癌细胞的杀伤作用,其机制可能与CX3CL1有关.