miR-497通过靶向调节YAP1表达对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响

• 作者: 刘九洲 任莎莎 付利军 李洪婷 李利文 邱新光
• 来源期刊: 中华内分泌外科杂志
• 关键词: 甲状腺乳头状癌 miR-497 Yes相关蛋白1 细胞生物学行为
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 甲状腺及甲状旁腺专题论著
• 页码范围: 21-26
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn.115807-20200911-00276

摘要

目的:探讨miR-497通过靶向调节Yes相关蛋白1（Yes-associated protein 1，YAP1）表达对甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）细胞生物学行为的影响。方法:将人PTC细胞株TPC-1细胞分为对照组、miR-497组、si-YAP1组和miR-497+si-YAP1组，采用LipofectamineTM3000脂质体转染，荧光素酶报告实验验证miR-497和YAP1靶向关系。MTT法检测各组细胞增殖活性，流式细胞仪分析细胞凋亡率，Transwell检测侵袭细胞数，划痕实验检测细胞迁移率。Western blot检测细胞周期素D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）和活化的半胱天冬酶3（cleaved Caspase-3）表达。采用SPSS 22.0分析数据，正态分布计量资料以均数±标准差（ ± s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两组间比较采用SNK-q。 结果:与对照组比，miR-497组和si-YAP1组细胞YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=14.682、14.597，23.743、23.571； P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=4.724、4.568、3.841，4.216、3.952、3.274； P<0.05），凋亡率升高（ q=3.783、4.336， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=5.823、5.981、6.036、6.485，5.934、6.110、6.573、6.614； P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=6.071、6.148， P<0.05）；与si-YAP1组相比，miR-497+si-YAP1组细胞miR-497水平升高（ q=14.726， P<0.05），YAP1 mRNA和蛋白表达下降（ q=3.089、3.126， P<0.05），细胞增殖活性、侵袭细胞数和迁移率下降（ q=2.654、2.537、2.246， P<0.05），凋亡率升高（ q=2.875， P<0.05），CyclinD1、MMP-2、MMP-9和cleaved Caspase-3蛋白表达下降（ q=4.371、4.365、4.383、4.368， P<0.05），TIMP-1蛋白表达升高（ q=4.275， P<0.05）。 结论:miR-497可靶向负调控YAP1表达，抑制TPC-1细胞增殖、侵袭和迁移。