Fat1通过细胞外调节蛋白激酶信号通路抑制食管鳞癌细胞增殖

• 作者: 杨斌 张云魁 叶永菁 刘陶东 彭胜祖 张荣生
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 关键词: 食管鳞癌 Fat1 细胞增殖 细胞外调节蛋白激酶信号通路
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 523-527
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112152-20190424-00262

摘要

目的:探讨Fat1对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖能力的影响及其机制。方法:以Plko.1-puro-GFP-shRNA-Fat1质粒转染KYSE450细胞，应用实时定量PCR检测Fat1敲低效率。采用四甲基偶氮唑蓝法检测Fat1和细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路抑制剂U0126对KYSE450细胞增殖能力的影响，平板克隆实验观察Fat1对ESCC细胞克隆形成能力的影响，活细胞动态观察细胞周期，Western blot方法检测相关靶蛋白的表达。通过裸鼠体内成瘤实验检测KYSE450细胞敲低Fat1后对移植瘤生长的影响，免疫组化方法检测肿瘤组织中相关蛋白的表达。结果:Fat1sh1组和Fat1sh2组细胞中Fat1敲低效率分别为(77.1±6.9)%和(77.7±7.1)%。与对照组相比，Fat1sh1组和Fat1sh2组细胞增殖明显加快( P<0.05)，细胞中p-ERK1/2的表达明显增加。经U0126处理后，Fat1敲低促进KYSE450细胞增殖的作用消失，细胞中p-ERK1/2的表达下降到与对照组相近的水平。对照组的细胞克隆数为(72±8)个，Fat1sh1组和Fat1sh2组分别为(155±28)个和(193±9)个，均高于对照组(均 P<0.05)。对照组细胞分裂1次的时间为(1 622±32)min，Fat1sh1组细胞分裂1次的时间为(1 408±29)min，比对照组明显缩短( P<0.05)。裸鼠成瘤实验显示，Fat1敲低组比对照组裸鼠移植瘤增长速度快，接种后4周，对照组和Fat1敲低组瘤体重量分别为(0.224±0.028)g和(1.532±0.196)g，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:Fat1可通过抑制ERK信号通路进而抑制ESCC细胞增殖。