果蝇F-box基因Ppa促进脂肪储存

• 作者: 杨光武 田嫄
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: 脂肪储存 脂滴 CRISPR/Cas9 Ppa
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Research Article
• 页码范围: 615-622
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16288/j.yczz.21-084

摘要

脂质是构成生物体的重要成分之一,脂质代谢的精确调节和稳态维持对人类健康至关重要.泛素化途径通过降解脂质相关蛋白来调控脂质代谢.Ppa(partner of paired)编码一种F-box蛋白,后者是SCF(Skp1-Cullin1-F-box)泛素化复合体成员之一.已有的研究表明Ppa在调控果蝇体节的正常发育和着丝粒组蛋白的正确定位方面发挥重要的作用,但在脂肪代谢方面的功能研究却未见报道.本研究以黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)作为研究对象,探究了Ppa在脂肪储存中的功能.通过与绿色荧光蛋白融合表达,检测PPA的亚细胞定位;应用CRISPR/Cas9技术,构建Ppa的缺失突变体;通过BODIPY 493/503或Nile red脂滴染色,对缺失突变体和超量表达Ppa果蝇的脂滴形态改变进行分析.随后,在缺失突变体中超量表达Ppa以验证其功能.结果表明,PPA-GFP融合蛋白定位于唾液腺和脂肪体的细胞核中.与对照组果蝇相比,Ppa缺失突变体表现为脂滴变小;超量表达Ppa显示出脂滴变大.在突变体中超量表达Ppa能够将脂滴回复至正常状态.综上所述,本研究揭示了Ppa在果蝇中具有促进脂肪储存的功能.