DR4去甲基化对髓性白血病K562细胞增殖凋亡作用的研究

• 作者: 张曼 蔡林衡 杨海平 杨学文 司晓慧
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 关键词: 髓性白血病 肿瘤坏死因子死亡受体4 去甲基化 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 白血病基础与临床|Leukemia Basis and Clinic
• 页码范围: 422-427
• 页数: 6页
• 分类号: R733.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2021.02.018

摘要

目的:研究肿瘤坏死因子死亡受体(DR)4去甲基化对髓性白血病K562细胞增殖、凋亡的影响.方法:取对数期K562细胞,采用地西他滨(DCA)0、0.8、1.6、3.2 μmol/L干预,分别设为对照、DCA低剂量、DCA中剂量和DCA高剂量4组.取对照组细胞,采用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)0.5 μg/ml干预24 h,设置为TRAIL组;取DCA高剂量组细胞,采用TRAIL 0.5 μg/ml干预24 h,设置为DCA高剂量+TRAIL组.甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测对照组和DCA低、中、高剂量组DR4基因启动子甲基化状态;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot检测对照组和DCA低、中、高剂量组DR4 mRNA及蛋白相对表达量;二甲基噻唑(MTT)法检测对照组、DCA高剂量组、TRAIL组、DCA高剂量+TRAIL组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测对照组、DCA高剂量组、TRAIL组、DCA高剂量+TRAIL组细胞的凋亡率.结果:对照组细胞呈甲基化阳性状态,DCA低、中、高剂量组甲基化条带亮度逐渐降低至消失,DCA高剂量组呈甲基化阴性状态;对照组和DCA低、中、高剂量组DR4 mRNA及蛋白相对表达量依次升高(r=0.624、0.704);对照、DCA高剂量、TRAIL、DCA高剂量+TRAIL组24、48和72 h增殖抑制率、凋亡率依次升高(r=0.653、0.754、0.709,0.725).结论:DCA可逆转ML K562细胞中DR4基因启动子甲基化水平,上调DR4表达,可能会增强TRAIL对K562细胞的增殖抑制及凋亡促进作用.