LIMK1过表达通过LIMK1/cofilin1通路促进人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭

• 作者: 周志刚 夏红 刘芳 苏坚 曾颖 苏琦
• 来源期刊: 中国医药导刊
• 关键词: 人胃癌MGC803细胞 LIMK1 真核表达载体转染 LIMK1/cofilin1通路 增殖 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 364-370
• 页数: 7页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0959.2021.05.015

摘要

目的:探讨LIMK1过表达对人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响.方法:真核表达载体转染技术构建过表达LIMK1基因MGC803细胞;RT-PCR和Western blot检测LIMK1、Cofilin1、p-Cofilin1表达;MTT、流式细胞术、细胞划痕和侵袭实验分别检测LIMK1过表达对MGC803细胞增殖、细胞周期、迁移与侵袭能力的影响.结果:成功构建稳定过表达LIMK1基因MGC803细胞.MTT显示,LIMK1过表达组细胞的增殖活性呈时间依赖性,高于对照组和空载体组(P<0.001).流式细胞术检测显示,LIMK1过表达组G2/M期细胞百分率8.36％,较MGC803组11.45％(P=0.0054)和空载体组11.59％降低(P=0.0056).划痕实验显示,24 h后LIMK1过表达组迁移距离(163.9±1.5)mm分别高于MGC803组(127.1±2.0)mm(P<0.0001)和空载体组(124.1±3.1)mm(P<0.0001).侵袭实验显示,LIMK1过表达组穿膜细胞(86.3±4.2)个分别明显多于MGC803组(48.3±2.5)个(P=0.0003)和空载体组(49.3±3.1)个(P=0.0003).RT-PCR和Western blot显示,LIMK1过表达组LIMK1表达分别高于对照组(P<0.0001)和空载体组(P=0.0002),p-LIMK1表达分别高于对照组(P=0.0003)和空载体组(P=0.0004).LIMK1过表达组Cofilin1 mRNA与蛋白表达较MGC803组和空载体组差异均无统计学意义(P>0.05),而p-Cofilin1表达分别高于对照组(P=0.0009)和空载体组(P=0.0018).结论:LIMK1过表达可通过激活LIMK1/cofi-lin1通路促进MGC803细胞增殖与迁移侵袭.