微小RNA-642a-5p通过靶向作用于Ⅰ型胶原α1对结肠癌细胞的迁移和侵袭的影响

• 作者: 郑光威 方志鹏 林劲权 林振吕 郑建涛
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 微小RNA 结肠癌 迁移 侵袭
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1511-1514
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20201223-01465

摘要

目的:探讨微小RNA-642a-5p(miR-642a-5p)对结肠癌细胞株SW620细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:将人结肠癌细胞SW620细胞分成4个组：对照组(OE-NC+mimic-NC组：共转染miR-642a-5p mimics阴性对照与空载体)；过表达miR-642a-5p组(OE-NC+mimic-miR-642a-5p组：共转染miR-642a-5p mimics与空载体)；过表达miR-642a-5p与Ⅰ型胶原α1(COL1A1)组(OE-COL1A1+mimic-miR-642a-5p组：共转染miR-642a-5p mimics与COL1A1过表达载体)；过表达COL1A1组(OE-COL1A1+mimic-NC组：共转染miR-642a-5p mimics阴性对照与COL1A1过表达载体)。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞内miR-642a-5p及COL1A1的表达；划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力；蛋白质印迹法(Western blot)实验检测细胞内COL1A1蛋白表达。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:RT-PCR结果显示应用miR-642a-5p mimics转染细胞后，miR-642a-5p表达水平显著增加；双荧光素酶报告基因实验结果miR-642a-5p直接靶向作用于COL1A1。应用(COL1A1 overexpression，OE-COL1A1)转染后，细胞COL1A1表达水平明显增加。而OE-NC + mimic-miR-642a-5p组和OE-COL1A1 + mimic-miR-642a-5p组的RNA相对表达量(18.62±2.31)，(2.52±0.44)明显高于OE-NC+mimic-NC组(0.52±0.11)，差异有统计学意义( t＝36.120、6.125， P<0.05)，且OE-COL1A1 + mimic-miR-642a-5p组的COL1A1相对表达量(5.88±1.06)明显高于OE-NC+mimic-miR-642a-5p组(0.22±0.04)，差异有统计学意义( t＝10.201， P<0.05)。与OE-NC + mimic-NC组比较，miR-642a-5p的过表达显著抑制了细胞的迁移和侵袭能力，而过表达COL1A1显著促进SW620细胞的迁移和侵袭能力，并部分逆转miR-642a-5p对细胞迁移和侵袭的抑制作用。 结论:miR-642a-5p可通过调节COL1A1的表达水平来抑制结肠癌细胞的迁移与侵袭。