4种猪绦虫蚴的多重PCR鉴别

• 作者: 陈国梁 郭爱民 张少华 梁盼红 李艳萍 王立群 刘婷丽 白雪 骆学农
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 关键词: 猪 4种绦虫蚴 多重PCR 鉴别诊断
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究|Experimental Studies
• 页码范围: 496-501
• 页数: 6页
• 分类号: R383.3|S855.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2021.00.073

摘要

目的 建立一种多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction,mPCR)方法,用于快速鉴别猪囊尾蚴等4种猪的绦虫蚴.方法 比较猪带绦虫(Taenia solium)、亚洲带绦虫(Taenia asiatica)、细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)和泡状带绦虫(Taenia hydatigena)的线粒体基因组,选取tRNA-Val、tRNA-Ala、tRNA-Asp和nad1基因作为分子检测靶标,设计4条种特异性上游引物(TaF、EgF、ThF、和TsF)和1条下游通用引物(TR),通过优化反应条件和体系,建立了在一个PCR体系中即可完成对4种猪绦虫蚴的快速鉴别的mPCR方法.结果 4种猪绦虫蚴的特异性PCR引物等比例混合后,在退火温度为50℃的条件下,该mPCR方法可同时扩增出C.cellulosae、T.asiatica、E.granulosus和C.tenuicol-lis的特异性基因片段,其大小分别为478 bp、710 bp、619 bp和542 bp.PCR产物测序后经BLAST比对,与同种虫体的基因序列相似性在99％以上.结论 本研究建立的mPCR方法具有很高的种间特异性,并且可通过扩增片段的大小对4种猪绦虫蚴进行快速、准确的鉴别.