miR-605对非小细胞肺癌细胞放射敏感性的影响

• 作者: 周东亚 张海兵 耿晓如 章杭 胡阳阳 周雷 王小龙 张璇
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 关键词: 肿瘤 非小细胞肺 细胞活力 蛋白表达 肿瘤坏死因子α诱导蛋白3 miR-605
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 415-420
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2021.04.008

摘要

目的 探讨miR-605对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞放射敏感性的影响及机制.方法 人肺腺癌细胞A549常规培养,使用Lipofectamine 2000转染试剂转染,分为miR-605模拟物组(miR-605 mimic)、miR-605抑制剂组(miR-605 inhibitor)和空白对照组(NULL),通过qRT-PCR实验检测3组细胞miR-605的表达,细胞克隆法检测3组细胞的细胞活力,细胞凋亡实验检测各组细胞凋亡水平;生物信息学算法确定肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(tTNFAIP3)是miR-605的潜在靶点,Western blot实验检测各组细胞TNFAIP3蛋白含量;将NFAIP33'-UTR报告质粒(pRL-TNFAIP3)转染进修饰过miR-605的A549细胞,采用双荧光素酶检测系统检测细胞中的荧光素酶活性,并观察其辐射敏感性.结果 与空白对照组比较,miR-605模拟物(miR-605 mimic)组中miR-605的表达水平明显升高,miR-605抑制剂(miR-605 inhibitor)组中miR-605的表达水平明显降低,差异有统计意义(P<0.05);细胞克隆法实验结果显示,照射后miR-605模拟物组的细胞活力水平高于空白对照组,miR-605抑制剂组的细胞活力水平低于空白对照组,miR-605模拟物组的细胞凋亡水平低于空对照组,miR-605抑制剂组的细胞凋亡水平高于空白对照组,差异有统计意义(P<0.05);照射后miR-605模拟物组TNFAIP3蛋白表达低于空白对照组(P<0.05),miR-605抑制剂组TNFAIP3蛋白表达高于空白对照组;miR-605模拟物能抑制TNFAIP33'-UTR报告基因的荧光素酶活性,miR-605抑制剂能提高TNFAIP33'-UTR报告基因的荧光素酶活性;照射后(6Gy)pcDNA-TNFAIP3组的细胞活力水平低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 下调miR-605后能够增强非小细胞肺癌细胞A549的放射敏感性,其机制可能是上调了TNFAIP3的表达.