shRNA干扰RACK1表达增强口腔鳞癌细胞放射敏感性的研究

• 作者: 刘冬梅 刘新菊 王雯 邱荣良
• 来源期刊: 中华放射肿瘤学杂志
• 关键词: RACK1基因 放射敏感性 HSC-3细胞 裸鼠移植瘤
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 物理·技术·生物
• 页码范围: 397-402
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn113030-20200410-00171

摘要

目的:探讨下调RACK1基因表达对口腔鳞癌细胞生长及放射敏感性的影响。方法:构建RACK1基因的shRNA载体，通过脂质体转染技术将其转入口腔鳞癌HSC-3细胞，G418筛选得到稳定转染细胞。荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测细胞中RACK1mRNA和RACK1蛋白表达水平；CCK8实验检测细胞生长能力；流式细胞仪检测细胞凋亡；细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭能力；克隆形成实验检测下调RACK1表达联合X射线照射对细胞增殖能力的影响。构建裸鼠移植瘤模型，观察下调RACK1基因表达联合X射线照射对口腔鳞癌的生长抑制作用。结果:RT-PCR和Western blot结果显示转染后HSC-3细胞RACK1mRNA相对表达量明显降低( P<0.05)，RACK1蛋白表达水平明显降低( P<0.05)。CCK8实验结果显示下调RACK1表达可抑制HSC-3细胞生长( P<0.05)，联合X射线照射使细胞凋亡率明显升高( P<0.05)，外侵袭穿透细胞数显著减少( P<0.05)。克隆形成实验结果显示shRACK1组的存活分数低于对照组，放射增敏比为1.37(D 0值比)。裸鼠移植瘤实验显示shRACK1组照射后瘤体生长缓慢，瘤体体积减小幅度低于对照组( P<0.05)，瘤体质量低于对照组( P<0.05)。 结论:下调RACK1表达可以增强口腔鳞癌细胞的放射敏感性，为提高口腔鳞癌放射敏感性研究提供新思路。