草鱼呼肠孤病毒NS31蛋白在昆虫细胞中表达及互作多肽筛选

• 作者: 万偲佳 喻飞 吕利群
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 草鱼呼肠孤病毒(GCRV) NS31蛋白 噬菌体展示技术 蛋白质相互作用
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 动物病毒研究论著|Animal Virus Articles
• 页码范围: 1448-1458
• 页数: 11页
• 分类号: S941.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004045

摘要

草鱼呼肠孤病毒(Grasscarpreovirus,GCRV)是引发病毒性草鱼出血病的主要病原.前期研究证实GCRV-S7基因片段编码NS31蛋白是GCRV的非结构蛋白,在病毒感染的中后期表达.为深入开展NS31的具体生物学功能,本研究从GCRV-JX01株病毒基因组中扩增NS31,克隆至pFastBacHTA载体;利用杆状病毒Bac-to-Bac系统成功表达携带his标签的重组蛋白his-NS31;Western-Blot和IFA实验表明重组杆状病毒能够感染昆虫细胞(Sf9)表达NS31,进一步通过his-Ni2+柱纯化NS31,SDS-PAGE鉴定蛋白约为30KD.运用噬菌体展示技术筛选噬菌体12肽库,研究NS31特异性结合多肽.挑取30个克隆进行DNA序列测定,结果表明NS31主要和2种多肽分子相互作用.进一步结合生物信息学分析表明上述多肽与草鱼基因组中6个基因具有同源性,提示其可能是NS31互作蛋白.本研究为深入探索NS31在病毒感染过程中的生物学功能奠定了重要基础.