基于金属有机框架的固定化酰胺酶制备及催化合成(S)-4-氟苯甘氨酸

• 作者: 林超平 汤江涛 郑仁朝 郑裕国
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 金属有机框架 酰胺酶 固定化 (S)-4-氟苯甘氨酸
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 生物育种与工艺优化|Biotechnological Breeding and Process Optimization
• 页码范围: 2936-2946
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.200616

摘要

以微水溶剂热法快速制备的稳定锆基金属有机框架为载体,戊二醛为交联剂,采用交联法对酰胺酶进行固定化,考察了不同条件对酰胺酶固定化效率的影响.结果 表明,戊二醛浓度为1.0％、交联时间为180 min、载体与酶的质量比为8∶1,固定化效率最佳,固定化酶活力回收率达86.4％,蛋白负载量达115.3 mg/g.固定化酶最适温度为40℃,最适pH值为9.0,在40℃下半衰期为72.2 d,该固定化酶的Km为58.32 mmol/L,Vmax为16.23 μmol/(min·mg),kcat为l 670 s-1.此外,考察了固定化酶催化合成(S)-4-氟苯甘氨酸的工艺:最适底物浓度300 mmol/L,固定化酶用量10 g/L,反应时间180 min,在最佳反应条件下转化率达49.9％,对映体过量(Enantiomeric excess,e.e.)为99.9％.进一步考察了该固定化酶分批催化反应性能,重复使用20批次后,固定化酶活力仍保留95.8％.