线粒体靶向抗氧化肽SS-31对脓毒症急性肾损伤的保护作用

• 作者: 孙敏 马建伟 叶继辉 樊恒 乐健伟 朱建华
• 来源期刊: 中华危重病急救医学
• 关键词: 脓毒症 急性肾损伤 线粒体靶向抗氧化肽SS-31 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（12）
• 所属期刊栏目: 论著·脓毒症（基础研究）
• 页码范围: 1418-1422
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn121430-20210719-01063

摘要

目的:探讨线粒体靶向抗氧化肽SS-31对脓毒症急性肾损伤（AKI）小鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:选择60只成年雄性C57BL/6小鼠，按随机数字表法分为假手术组（10只）、阳性对照组（10只）、脓毒症模型组（20只）和SS-31肽干预组（20只）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症AKI模型；假手术组只开腹，不进行CLP。阳性对照组和SS-31肽干预组于术后30 min腹腔注射SS-31肽注射液（5 mg/kg）；假手术组和模型组给予等量生理盐水；4组均连续给药7 d。于术后24 h眼眶采血，分离血清检测血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平；术后7 d处死小鼠，取肾脏组织行苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观察肾脏组织病理学变化，透射电镜下观察肾脏组织线粒体超微结构改变，原位末端缺刻标记试验（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡情况，蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的蛋白表达水平。结果:与假手术组比较，脓毒症模型组术后24 h SCr和BUN均明显升高〔SCr（μmol/L）：93.12±11.80比32.94±3.37，BUN（mmol/L）：41.36±6.48比9.49±3.58，均 P<0.05〕，肾脏组织AMPK、PGC-1α和活化的caspase-3的蛋白表达水平均明显增加（AMPK/β-actin：0.30±0.02比0.12±0.01，PGC-1α/β-actin：0.38±0.03比0.16±0.02，活化的caspase-3/β-actin：0.20±0.01比0.11±0.02，均 P<0.05）；光镜下可见炎性细胞浸润，肾小球基底膜暴露，管腔内可见空泡样透明管型；电镜下可见线粒体损伤，出现肿胀、嵴消失、内外膜破裂，凋亡细胞数明显增多〔个：24.00（18.75，31.00）比2.00（0.72，3.25）， P<0.05〕。与脓毒症模型组比较，SS-31肽干预组血清SCr、BUN水平及肾脏组织AMPK、PGC-1α、活化的caspase-3的蛋白表达量均明显降低〔SCr（μmol/L）：71.33±10.14比93.12±11.80，BUN（mmol/L）：27.00±5.52比41.36±6.48，AMPK/β-actin：0.23±0.01比0.30±0.02，PGC-1α/β-actin：0.27±0.02比0.38±0.03，活化的caspase-3/β-actin：0.13±0.01比0.20±0.01，均 P<0.05〕；光镜下可见细胞肿胀减轻，透明管型减少，损伤程度较脓毒症模型组减轻；电镜下可见线粒体结构完整，嵴肿胀减轻，膜结构相对完整，凋亡细胞数明显减少〔个：13.00（9.00，16.50）比24.00（18.75，31.00）， P<0.05〕。 结论:SS-31肽对脓毒症AKI诱导的器官功能障碍的保护作用可能与维持线粒体稳态、抑制细胞凋亡有关。