热休克蛋白70对H9C2细胞免受氧糖剥夺损伤的保护作用及分子机制

• 作者: 刘天宇 夏斌 任冠桦 席镇 刘永新 孙忠东 隽兆东
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 热休克蛋白70 心肌缺血 凋亡 基质相互作用分子1
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 689-691
• 页数: 3页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20200907-01306

摘要

目的:观察热休克蛋白70(HSP70)在对抗氧糖剥夺中的作用和发挥抗凋亡中的分子机制，寻找HSP70发挥作用的靶点。方法:应用转染的技术将质粒和小干扰RNA(siRNA)转染入H9C2细胞内来过表达和沉默HSP70在细胞内的表达，将细胞分为对照组(control组)、缺氧复氧组(H/R组)、过表达组(H/R+HSP70)、过表达阴性对照组(H/R+NC)、沉默组(H/R+siRNA)、沉默阴性对照组[H/R+NC(siRNA)]。建立心肌细胞的缺氧复氧模型。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞凋亡率，通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、基质相互作用分子1(STIM1)的RNA表达水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测bax、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、基质相互作用分子1(STIM1)的表达，组间比较采用单因素方差分析。结果:过表达组的凋亡细胞及凋亡蛋白bax(1.97±0.01)明显低于单纯缺氧复氧组bax(2.15±0.03， F＝356.275， P<0.05)，差异有统计学意义，而沉默组的凋亡细胞和凋亡蛋白bax(6.09±0.17)明显高于单纯缺氧复氧组bax(2.15±0.03， F＝356.275， P<0.05)，差异有统计学意义；过表达组STIM1的表达量(3.14±0.14)明显低于单纯缺氧复氧组(4.46±0.20， F＝26.602， P<0.05)，差异有统计学意义，而沉默组STIM1的表达量(8.58±0.24)明显高于单纯缺氧复氧组(4.46±0.20， F＝26.602， P<0.05)，差异有统计学意义。 结论:HSP70可能通过STIM1调节内质网钙失衡发挥抗凋亡作用。