黄柏碱对LPS诱导小胶质细胞活化的抑制作用及其机制研究

• 作者: 许孟秋 陆韵薇 易慧敏 于顾然
• 来源期刊: 中医药导报
• 关键词: 小胶质细胞 黄柏碱 脂多糖 神经炎症 TLR-4/MYD-88/NF-κB
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 实验
• 页码范围: 10-15
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨黄柏碱对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞活化的抑制作用及其机制.方法:采用脂多糖(1 μg/mL)处理BV2小胶质细胞建立体外小胶质细胞活化模型,将细胞分别设为对照组,模型组,抑制剂组(resatorvid,TLR-4抑制剂)和黄柏碱低、中、高剂量组,使用噻唑蓝(MTT)比色法检测黄柏碱对LPS处理后BV2小胶质细胞活性的影响;倒置相差显微镜下观察各组细胞形态变化;Griess法测定黄柏碱处理前后对NO水平影响;Western blotting法检测炎症蛋白 iNOS、COX-2、TNF-α表达,以及通路蛋白 TLR-4/MYD-88/NF-κB(p65)的表达情况.免疫荧光法检测黄柏碱对LPS(1 μg/mL)诱导BV2小胶质细胞活化后iNOS、NF-KB(p65)的荧光值及核定位情况.结果:MTT结果显示不同浓度黄柏碱,不同浓度LPS,不同浓度黄柏碱+LPS,以及抑制剂+LPS对BV2小胶质细胞活性无明显影响;与对照组比较,LPS处理后小胶质细胞胞体变大,突起变短、形态呈"阿米巴状",NO释放量增加,黄柏碱处理后改善;与LPS模型组比较,100、200、300μmol/L黄柏碱均能不同程度降低iNOS、COX-2、TNF-α、TLR-4、MYD-88、NF-κB(p65)蛋白表达水平,并能抑制NF-κB的核转移及iNOS在胞浆内的表达.结论:黄柏碱对LPS刺激所致的BV2小胶质细胞炎症反应有保护作用,其机制可能与抑制TLR-4/MYD-88/NF-κB(p65)通路激活及炎症因子释放有关.