鼠伤寒沙门氏菌yejE基因缺失对沙门氏菌囊泡结构完整性的影响

• 作者: 李瑞 肖金雨 娄莉萍 何流 唐田
• 来源期刊: 现代预防医学
• 关键词: 鼠伤寒沙门氏菌 yejE基因 沙门氏菌囊泡 协同作用
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用|Experimental Technology and Applications
• 页码范围: 916-920,929
• 页数: 6页
• 分类号: R117
• 语种: 中文

摘要

目的 沙门氏菌囊泡(Salmonella-containing vacuole,SCV)是沙门氏菌进入宿主细胞后产生的一种类似于吞噬体的结构.SCV结构完整性一旦被破坏,其内包裹的沙门氏菌将进入细胞质并通过MHC-I途径激活宿主CD8+T细胞免疫应答.有研究表明沙门氏菌yejE基因能够影响宿主CD8+T细胞免疫应答,但具体机制尚不明确.本研究将观察并计算yejE基因缺失后鼠伤寒沙门氏菌的SCV逃逸率,探讨沙门氏菌yejE基因是否通过改变SCV的结构稳定性,影响宿主的CD8+T细胞免疫应答.方法 (1)采用Red同源重组技术或P22噬菌体转导技术,在减毒沙门氏菌TT-16(AclpP TT-1)的基础上构建缺失了sifA、yejE基因或二者同时缺失的减毒沙门氏菌,随后导人质粒pGEX-6P-1-sf-GFP,获得一系列能够在IPTG诱导下表达绿色荧光蛋白的减毒沙门氏菌;(2)用构建好的菌株分别感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,于感染后2h和6h进行免疫荧光染色;(3)采用激光共聚焦显微镜观察并计算各菌株的SCV逃逸率.结果 感染后2h和6 h,鼠伤寒沙门氏菌yejE和sifA单缺失株的逃逸率均显著高于亲本株,且sifA与yejE双基因缺失株的逃逸率与yejE或sifA单缺失株的SCV逃逸率相比无显著差异性.结论 鼠伤寒沙门氏菌yejE基因能通过改变SCV的结构完整性,影响宿主CD8+T细胞免疫应答;此外,sifA与yejE基因可能通过相同的途径影响SCV的结构完整性.