刘氏正骨方2号对过表达Sclerostin腺病毒转染后BMSCs促成骨分化的影响

• 作者: 俞云飞 王建伟 冯骅 尹恒 华臻 吴毛
• 来源期刊: 中成药
• 关键词: 刘氏正骨方2号 Sclerostin腺病毒 BMSCs Wnt信号通路 成骨相关因子
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 科研报道
• 页码范围: 2509-2514
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1528.2021.09.045

摘要

目的 探究刘氏正骨方2号对过表达Sclerostin腺病毒转染后BMSCs中Wnt信号通路及成骨相关因子的影响.方法 分别用刘氏正骨方2号含药血清、BMP-2干预BMSCs,并分为对照组、中药组、BMP-2组,采用CCK-8法检测细胞活性,ALP染色、茜素红染色检测成骨诱导28 d后各组细胞ALP活性和矿化情况,荧光定量PCR、Western Blot法检测各组细胞中Col1A2、OCN、OPN、Sclerostin表达.采用腺病毒转染技术过表达BMSCs中Sclerostin基因,分为空白对照组、过表达Sclerostin组,再分别用空白血清、中药血清体外干预3d后,检测Wnt信号通路相关分子(LRP5、β-catenin)和成骨相关因子Runx2的表达情况.结果 与空白对照组比较,中药组BMSCs细胞活性及成骨分化程度增强,BMP-2组成骨分化程度高于中药组,但BMP-2组细胞活性最低(P＜0.05);在Sclerostin基因表达方面,中药组出现表达抑制,而BMP-2组呈上调趋势(P＜0.05).腺病毒转染BMSCs可抑制BMSCs细胞活性,上调Sclerostin mRNA和蛋白表达.与NT比较,Ad-SOST组细胞活性降低,LRP5、β-catenin、Runx2表达下调(P＜0.05);与空白血清比较,中药血清干预后NT组、Ad-SOST组细胞活性不同程度增强,而LRP5、β-catenin、Runx2表达上调(P＜0.05).结论 刘氏正骨方2号具有增强BMSCs细胞活性、促进成骨分化作用,可影响过表达Sclerostin腺病毒转染后BMSCs的LRP5、β-catenin、Runx2表达.