茶树黄金芽CsHIPP26.1蛋白螯合离子的筛选与鉴定

• 作者: 刘富浩 范延艮 王域 孟凡月 张丽霞
• 学科: 农学
• 关键词: 重金属异戊二烯植物蛋白 CsHIPP26.1 金属离子 茶树
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 179-186
• 页数: 7页
• 分类号: S571.1
• 语种: 中文

摘要

重金属相关异戊二烯化植物蛋白（HIPPs）由于其独特的重金属结合域和异戊二烯序列的结构特点，成为一类重要的金属分子伴侣。为鉴定茶树（Camelliasinensis）黄金芽CsHIPP26.1蛋白的螯合离子，将pET-32a-CsHIPP26.1重组质粒和空载体分别转入大肠杆菌BL21，在分别添加4mol·L-1的单一金属离子（CuCl2、ZnCl2、MgCl2、FeCl3、CaCl2）或5种金属离子混合液以及1mmol·L-1IPTG诱导的LB液体中培养，观测大肠杆菌的生长情况，并用His-tag蛋白纯化磁珠纯化获得融合目的蛋白，经原子吸收分光光度计分析融合蛋白中金属离子含量，计算蛋白螯合的离子数目。结果表明，CsHIPP26.1蛋白仅与Zn2+和Cu2+螯合，且螯合Zn2+的能力显著强于Cu2+。根据其结合金属离子与目的蛋白质量摩尔比推测，CsHIPP26.1蛋白螯合Zn2+、Cu2+金属离子的最大数目分别为2和1。