褪黑素通过NRF2对氯胺酮诱导的尿路上皮损伤保护作用研究

• 作者: 李松恒 米华
• 来源期刊: 右江民族医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 氯胺酮相关性膀胱炎 NRF2 褪黑素
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 论著与临床报道
• 页码范围: 147-154
• 页数: 8页
• 分类号: R694.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5817.2022.02.002

摘要

目的 在细胞水平探究褪黑素通过NRF2对氯胺酮相关性膀胱炎(KC)尿路上皮损伤的保护作用.方法 首先利用Western blot验证NRF2在氯胺酮刺激后的SV-HUC-1细胞的表达水平变化;构建沉默NRF2的SV-HUC-1细胞株,利用流式细胞术检测氯胺酮共培养后的细胞凋亡率;利用CCK-8筛选褪黑素的工作浓度,将SV-HUC-1细胞分为对照组(CON),氯胺酮组(KET),褪黑素治疗组(KET+褪黑素)和褪黑素组,利用Western blot检测NRF2、HO-1蛋白表达丰度,利用实时荧光定量PCR检测IL-6 mRNA表达水平,并测定SOD水平变化情况.结果 氯胺酮共培养后的SV-HUC-1细胞NRF2表达水平显著降低(P<0.001);成功构建沉默NRF2的稳定转染细胞株,si-NRF2组的NRF2表达水平低于si-NC组(P<0.05);si-NRF2+氯胺酮组[(14.717±0.601)％]和si-NC+氯胺酮组[(10.890±0.429)％]的细胞凋亡率显著高于si-NC组[(8.560±0.846)％](P<0.01)和si-NRF2组[(9.023±0.703)％](P<0.01);且si-NRF2+氯胺酮组的凋亡率显著高于si-NC+氯胺酮组(P<0.001).选取100μM为褪黑素的工作浓度.KET组的IL-6 mRNA表达水平(1.415±0.286)显著高于CON组(1.024±0.230)(P<0.01);KET+褪黑素组(1.026±0.344)的IL-6 mRNA表达水平显著低于KET组(P<0.01);KET+褪黑素组SV-HUC-1细胞的SOD(20.521±1.351)显著高于CON组(15.461±2.018)(P<0.001)和KET组(15.763±2.216)(P<0.0001);KET组SV-HUC-1细胞NRF2的表达丰度(0.428±0.101)低于CON组(1.500±0.081)(P<0.0001);KET+褪黑素组的NRF2表达丰度(0.804±0.100)高于KET组(P<0.01).除此之外,KET+褪黑素的HO-1的表达丰度(1.419±0.098)高于CON组(0.352±0.168)(P<0.0001)和KET组(0.199±0.046)(P<0.0001).结论 褪黑素能够通过NRF2保护氯胺酮导致的尿路上皮损伤.