miR-194-5p通过靶向TLR4/NF-κB通路调控免疫因子IL-6/10对肾病综合征大鼠细胞凋亡的影响

• 作者: 陈义忠 何毅辉 陈琅 缪长新 郑鑫
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肾病综合征 miR-194-5p Toll样受体4 核因子-κB 凋亡
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学|Research Articles
• 页码范围: 116-123
• 页数: 8页
• 分类号: R692.3+9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20220017

摘要

目的 探究微小RNA (microRNA,miR)-194-5p通过靶向Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)/核因子(nuclear factor,NF)-κB通路调控免疫因子(interleukin,IL)-6/10对肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)大鼠肾细胞凋亡的影响.方法 将通过嘌呤霉素氨基核苷构建的NS大鼠随机分为NS组、NS+miR-194-5p agomir组和NS+miR-194-5p antagomir组(n=15),通过腹腔内注射miR-194-5p agomir或antagomir(300 μg)以提高或抑制miR-194-5p.检测各组大鼠肾功能指标、炎性因子、凋亡情况以及TLR4/NF-κB通路水平.通过双荧光素酶报告验证miR-194-5p和TLR4的靶向关系.将肾胚细胞293细胞分为miR-194-5p NC组和miR-194-5p mimic组,通过转染miR-194-5p mimic过表达miR-194-5p,通过RT-qPCR和Western blot检测各组TLR4 mRNA和蛋白水平.结果 NS组的24 h尿蛋白、肌酐、凋亡指数、IL-6、IL-10、TLR4和NF-κB蛋白表达水平均显著高于健康组(P＜0.05);与NS组比较,NS+miR-194-5p antagomir组大鼠的24h尿蛋白、肌酐、凋亡指数、IL-6、TLR4和NF-κB蛋白表达水平均显著升高,IL-10水平显著降低(P＜ 0.05);NS+miR-194-5p agomir组的24 h尿蛋白、肌酐、凋亡指数、IL-6、IL-10、TLR4和NF-κB蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).双荧光素酶报告结果表明miR-194-5p可以与TLR4靶向结合.miR-194-5p mimic组细胞中的TLR4 mRNA和蛋白表达水平显著低于miR-194-5p NC组(P＜0.05).结论 miR-194-5p可通过靶向抑制TLR4/NF-κB通路减少免疫炎性因子的释放和抑制细胞凋亡,从而缓解肾组织损伤缓解NS.