山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1的原核表达及生物信息分析

• 作者: 张成 王玉婷 杨勇飞 柳璇 吴锦艳 尚佑军 李有文
• 来源期刊: 现代畜牧兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊痘病毒 晚转录因子VLTF-1基因 原核表达 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 20-25
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文

摘要

试验旨在研究山羊痘病毒晚转录因子VLTF-1的特性.研究以山羊痘病毒SS基因组株为模板,采用PCR方法扩增晚转录因子VLTF-1基因,采用基因克隆常规方法与pET-42b表达载体相连接构建原核表达载体,经菌液PCR、双酶切和测序鉴定,阳性克隆转化大肠杆菌BL21,以0.1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳和Western Blot检测表达情况;同时对VLTF-1基因及其蛋白特性进行生物信息学分析.结果显示,PCR扩增的目的基因全长783 bp,与参考株Pellor同源性为100％,推测其编码261个氨基酸.遗传进化树分析表明,羊痘病毒属的3个种各分成一个分支,目的基因与山羊痘毒株位于同一分支.测序结果显示,目的基因表达载体构建正确,SDS-PAGE检测表达了27 kDa的蛋白,Western Blot鉴定表明目的蛋白得到表达.生物信息学分析结果显示,SS株的VLTF-1基因与山羊痘病毒聚于一支,该蛋白是一个跨膜亲水蛋白,具有26个磷酸化位点,二级结构是其结构连接5个α-螺旋.研究表明,试验成功克隆晚转录因子VLTF-1基因,并诱导表达蛋白,预测该蛋白的生物学信息.