猪丁型冠状病毒可视化LAMP检测方法的建立与应用

• 作者: 赵云环 罗尚星 顾文源 刘涛 刘莹 郭禹 左玉柱 范京惠
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪丁型冠状病毒 环介导等温扩增 可视化 羟基萘酚蓝 检测
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 19-24
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0006

摘要

为建立一种简单、快捷,适用于基层检测猪丁型冠状病毒(PDCoV)的方法,根据GenBank上登录的PDCoV N基因的保守序列设计了1组环介导等温扩增(LAMP)引物,以重组质粒pMD19-T-N为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,优化反应条件及体系,并检测该方法的特异性及灵敏度.结果 显示,该方法与猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型均无交叉反应,且最低检测量为5.1×101 copies/μL.进一步对本实验室2016年至2019年在河北保定收集的95份临床样品进行检测,LAMP检测结果与普通RT-PCR检测结果的符合度高,检测时间为1h.结果 表明,本研究中建立的LAMP检测方法简便、特异、灵敏、快速,有望在PDCoV的临床检测中发挥重要作用.