鉴别检测野生株和基因缺失株非洲猪瘟病毒多重荧光定量PCR方法的建立

• 作者: 韩勇军 曹鹏程 赵亚齐 侯广争 王学军 马增彬 刘丽艳
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 多重荧光定量PCR 鉴别诊断 基因缺失株
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 41-47
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0034

摘要

为建立一种鉴别检测野生型和基因缺失株非洲猪瘟病毒(ASFV)的方法,本研究根据GenBank中登录的ASFV P72、CD2v、MGF360-14L基因保守序列设计引物和探针,通过方阵法优化体系后,建立了一种可以同时检测P72、CD2v、MGF360-14L基因的多重荧光定量PCR方法.该方法与伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均无交叉反应,可鉴别野生型和基因缺失株ASFV,特异性强;敏感性试验结果显示,该方法对P72、CD2v和MGF360-14L重组质粒标准品的最低检测限均为100 copies/mL,敏感性高;组内和组间变异系数均小于2％,表明该方法重复性较好.利用ASFV核酸检测试剂盒与本实验室建立的方法分别对35份临床样品进行检测,两种方法的检出率均为68.57％,阳性符合率为100％.上述结果表明,本研究建立的多重荧光定量PCR方法对ASFV的鉴别检测、病原流行病学调查等研究具有重要意义.