mTOR/HIF-1α信号通路在布-加综合征肝纤维化中的作用机制研究

• 作者: 张跃辉 李素新 杨净 李丁洋 李林 王培举 党晓卫
• 来源期刊: 国际外科学杂志
• 关键词: 小鼠 肝 纤维化 肝疾病 mTOR/HIF-1α信号通路 布-加综合征
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 237-242,F3-F4
• 页数: 1页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn115396-20220121-00031

摘要

目的:探讨mTOR/HIF-1α信号通路在布-加综合征(B-CS)肝纤维化中的作用机制。方法:雄性C57小鼠20只按随机数字表法分为假手术(Sham)组、假手术+雷帕霉素(Sham+Ra)组、B-CS组、B-CS+雷帕霉素(B-CS+Ra)组，每组均5只。于肝后段下腔静脉(IVC)部分结扎构建B-CS小鼠模型；Sham组未结扎IVC。Sham+Ra和B-CS+Ra组小鼠隔天腹腔注射雷帕霉素(2 mg/kg，5%DMSO溶液配制)，Sham组和B-CS组注射同等剂量5%DMSO溶液。6周后取材，部分肝脏组织用于制作石蜡切片进行苏木精-伊红、天狼星红染色观察病理变化，免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、Fibrinogen的表达；新鲜肝脏组织提取蛋白和RNA，分别用Western-blot检测α-SMA、Fibrinogen、p-mTOR、mTOR、HIF-1α、CollagenⅠ、VEGF蛋白水平，实时荧光定量PCR检测mTOR、HIF-1α、VEGF mRNA水平。计量资料用均数±标准差( ± s)表示，组间的比较采用单因素ANOVA检验。 结果:病理染色结果显示，B-CS组小鼠肝脏中央静脉周围及肝窦淤血严重，窦间隙增宽，胶原沉积增加，表明本研究成功建立小鼠B-CS肝纤维化模型。Sham组纤维化指标α-SMA、CollagenⅠ蛋白，mTOR通路相关指标p-mTOR、HIF-1α蛋白，微血栓指标Fibrinogen蛋白表达量分别为0.027±0.012、0.337±0.008、0.138±0.024、0.296±0.113、0.733±0.192；B-CS组分别为0.986±0.001、0.927±0.055、0.936±0.044、1.693±0.443、1.612±0.068，两组相比差异有统计学意义( P<0.05)。B-CS+Ra组表达量分别为0.707±0.078、0.311±0.024、0.332±0.094、0.254±0.117、0.569±0.075，与B-CS组相比，差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论:mTOR/HIF-1α信号通路在小鼠B-CS肝纤维化中被显著激活，该通路可通过调节微血栓形成，参与肝纤维化发展。